|
15 марта 2007 г.
В настоящее время внутривенное лазерное облучение крови широко применяется в клинике при лечении различных заболеваний и патологических состояний. В ряду лечебных эффектов отмечено угнетение функции тромбоцитов при лазерном облучении крови (Никитин В.П., Фотиади А.Э., 1990, Спасов и др., 1998). Появление светодиодных излучателей повышенной яркости позволило создать фототерапевтические аппараты, способные генерировать свет различных длин волн. Дерябин Е.И. (1997) установил, что светодиодное излучение красного диапазона позволяет достигать лечебных эффектов, адекватных эффектам красного лазерного воздействия, которое широко применяется в клинике. Несмотря на то, что светодиодное излучение различных длин волн уже применяется в клинике, исследований, посвященных изучению влияния различных длин волн на организм, еще недостаточно.
Сравнительное изучение влияния излучения светодиодных матриц с различными длинами волн на индуцированную агрегацию тромбоцитов в цельной крови крыс, а также изучение некоторых механизмов ингибирования функциональной активности тромбоцитов под влиянием красного светового излучения.
Опыты проводились на белых крысах-самцах линии Wistar массой 200-240 г из питомника Рапполово. Под эфирным наркозом из яремной вены отбирали кровь, стабилизированную гепарином (50 Ед на 1 мл крови). Забор крови проводили в силиконированные пробирки. Исследования индуцированной агрегации тромбоцитов проводились на импедансном агрегометре АИ-300. Импедансный метод позволяет проводить оценку функциональной активности тромбоцитов в цельной крови. Образец крови в объеме 0,55 мл инкубировали в термостате в течение 2-3 мин при 37 град С. Затем пробу переносили в камеру прибора, куда помещали датчик и вводили индуктор агрегации в объеме 0,05 мл. В качестве индуктора агрегации применяли АДФ в физиологическом растворе в конечной концентрации 2,55х10-4 моль/л и адреналин в трио-буфере рН=7,4 в конечной концентрации 10-4 моль/л. Пробы крови облучались светодиодными матрицами (фирма Kingbright, США), излучающими свет с длинами волн 430 нм, 565 нм, 595 нм, 660 нм и 880 нм, в специальной камере в темноте. В качестве контроля использовалась цельная крысиная кровь без облучения. В другой серии экспериментов проводили исследовании агрегации на фоне применения красного светодиодного излучения (660 нм) и одного из антиоксидантов (дисульфурама, каталазы или морина) по отдельности и при совместном применении.
Во всех опытах с применением света различных длин волн, но одинаковой плотности потока энергии (ППЭ) (0,045 Дж/см) наблюдалось уменьшение интенсивности агрегации, наиболее выраженное при облучении крови синим и красным светом - на 37% и 45% соответственно (р<0,05). Для выявления зависимости "ППЭ-эффект" были проведены исследования в диапазоне ППЭ от 0,015 до 2,48 Дж/кв.см. При использовании светодиодной матрицы синего света при ППЭ облучения 0,13 Дж/кв.см, 0,26 Дж/кв.см и 0,39 Дж/кв.см интенсивность адреналининдуцированной агрегации уменьшилась на 24%, 45% и 49%, а АДФ-индуцированной агрегации - на 10%, 14% и 27% соответственно. Аналогичная динамика - уменьшение интенсивности агрегации при увеличении ППЭ, отмечена также при применении светодиодной матрицы красного цвета. При облучении зеленым светом с ППЭ 0,03 Дж/кв.см, 0,06 Дж/кв.см, 0,09 Дж/кв.см наиболее выраженное подавление интенсивности адреналининдуцированной и АДФ-индуцированной агрегации на 38% и 46% соответственно (р<0,05) отмечено при применении минимальной ППЭ. Аналогичные результаты отмечены при облучении крови светом желтого и инфракрасного диапазонов. Таким образом, влияние светодиодного излучения в диапазоне длин волн 430 - 880 нм на агрегацию тромбоцитов было однонаправленным, но выраженность его зависела от длины волны и дозы.
Под воздействием облучения красного света отмечено достоверное уменьшение интенсивности агрегации (р<0,001). Изолированное применение диульфурама также привело к достоверному уменьшению интенсивности агрегации (р<0,001), в то время, как под воздействием морина изменения не были достоверными, а при применении каталазы отмечено ускорение интенсивности агрегации (р<0,001). При сочетанном воздействием облучения красного света и антиоксидантов также отмечено достоверное уменьшение интенсивности агрегации по сравнению с контролем. При совместном действии красного света и дисульфурама отмечено наиболее выраженное подавление агрегации.
Наши данные согласуются с литературными данными об ингибирующем эффекте излучения красного света на агрегационную функцию тромбоцитов. Брилль А.Г. (1998) объяснил данный эффект увеличением в облученных тромбоцитах уровня цГМФ за счет активации его синтеза растворимой гуанилатциклазой. Нельзя исключить также первичное повышение уровня NО в цельной крови с последующим проявлением антиагрегантных свойств данного соединения. Необходимо отметить, что ферменты гуанилатциклаза и NО синтаза имеют в своем составе гем, который может являться первичным акцептором светового излучения. В пользу данного предположения говорит тот факт, что антиагрегантная активность тромбоцитов подавлялась более эффективно под воздействием излучения синего и красного света, т.е. под влиянием тех длин волн, которые в наибольшей степени поглощаются гемом. Выявленые феномены усиления антиагегантного эффекта при совместном применении света и ингибиторов СОД, а также нивелирование проагрегантогого эффекта каталазы при световом воздействии достойно более пристального изучения. Предполагается продолжить исследования с целью прямого измерения количества уровня NO в тромбоцитах при световом облучении с применением различных длин волн. |
